這篇論文研究了綠原酸（Chlorogenic Acid, CHA）通過(guò)ACAT1-TPK1-PDH途徑誘導(dǎo)神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞分化。

綠原酸（CHA）調(diào)節(jié)ACAT1-TPK1-PDH通路促進(jìn)神經(jīng)母細(xì)胞瘤分化

研究背景

1、神經(jīng)母細(xì)胞瘤是一種在未分化的交感神經(jīng)節(jié)細(xì)胞中發(fā)展的癌癥，具有高發(fā)病率，尤其在兒童中。目前的治療方法包括化療、干細(xì)胞移植、手術(shù)、放療等，但這些方法無(wú)法有效抑制腫瘤復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移。

2、神經(jīng)母細(xì)胞瘤的高度異質(zhì)性限制了現(xiàn)有治療方法的療效，并導(dǎo)致藥物耐藥性。因此，迫切需要研究新的治療機(jī)制和方法。

3、維甲酸（RA）是目前最有效的誘導(dǎo)神經(jīng)母細(xì)胞瘤分化的藥物，但對(duì)MYCN擴(kuò)增的患者無(wú)效。綠原酸（CHA）是一種從植物中提取的小分子天然化合物，具有抗炎、抗氧化和抗腫瘤活性，但其對(duì)神經(jīng)母細(xì)胞瘤的作用尚未被評(píng)估。

研究方法

1、使用Be(2)-M17和SH-SY5Y神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系來(lái)確認(rèn)分化表型。細(xì)胞在CHA處理后，通過(guò)EdU染色、細(xì)胞周期分析、遷移和克隆形成能力測(cè)試等方法評(píng)估其分化情況。

2、構(gòu)建了皮下和原位異種移植小鼠模型，評(píng)估CHA的抗腫瘤活性。通過(guò)Ki-67表達(dá)和MAP2分化標(biāo)志物的水平來(lái)評(píng)估腫瘤生長(zhǎng)情況。

3、使用Seahorse實(shí)驗(yàn)和代謝組學(xué)分析研究CHA及其靶點(diǎn)ACAT1在線粒體代謝中的作用。通過(guò)檢測(cè)氧消耗率（OCR）來(lái)評(píng)估細(xì)胞的氧化磷酸化（OXPHOS）能力。

實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

1、CHA處理后，Be(2)-M17和SH-SY5Y細(xì)胞的增殖速度減慢，細(xì)胞形態(tài)發(fā)生明顯變化，細(xì)胞周期在G0/G1期被阻滯，遷移和克隆形成能力減弱。

2、在小鼠模型中，CHA顯著抑制了腫瘤生長(zhǎng)，且未導(dǎo)致體重下降。原位異種移植模型也顯示了類似的結(jié)果。

3、代謝組學(xué)分析顯示，CHA處理后，硫胺素代謝途徑被激活，TPK1表達(dá)上調(diào)，PDH酶活性增強(qiáng)。

結(jié)果與分析

1、CHA通過(guò)抑制ACAT1誘導(dǎo)神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞分化。ACAT1敲除后，細(xì)胞形態(tài)趨于成熟，腫瘤生長(zhǎng)緩慢，Ki-67表達(dá)減少，MAP2表達(dá)增加。

2、CHA處理恢復(fù)了神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞的OXPHOS能力，ACAT1敲除也觀察到類似結(jié)果。

3、硫胺素代謝途徑在ACAT1介導(dǎo)的分化中起重要作用。CHA和ACAT1敲除均上調(diào)了TPK1表達(dá)，激活了硫胺素代謝途徑，增強(qiáng)了PDH酶活性。

總體結(jié)論

CHA通過(guò)抑制線粒體ACAT1促進(jìn)神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞分化。ACAT1的消除上調(diào)了TPK1表達(dá)，激活了硫胺素代謝途徑，并恢復(fù)了細(xì)胞的OXPHOS功能。研究為CHA在神經(jīng)母細(xì)胞瘤治療中的臨床應(yīng)用提供了理論基礎(chǔ)，并為神經(jīng)母細(xì)胞瘤的治療提供了一個(gè)有吸引力的靶點(diǎn)和方案。

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